DSpace Собрание:
http://dspace.zsmu.edu.ua/handle/123456789/463
2024-03-19T09:44:08ZФармакологічна модуляція HSP70 – опосередкованих механізмів нейропротекції в умовах церебральної ішемії
http://dspace.zsmu.edu.ua/handle/123456789/17063
Название: Фармакологічна модуляція HSP70 – опосередкованих механізмів нейропротекції в умовах церебральної ішемії
Авторы: Біла, Юлія Володимирівна; Bila, Yu. V.
Аннотация: В дисертаційній роботі були дослідженні молекулярно-біохімічні механізми нейропротективної дії тамоксифену, мелатоніну, HSF-1 і глутаміну, які спрямовані на підвищення концентрації білку теплового шоку HSP70 в ішемізованому мозку. Внаслідок підвищення рівня HSP70 спостерігається підсилення стійкості нейронів до ішемічних пошкоджень в дослідах in vitro і in vivo. Досліджувані препарати: тамоксифен, мелатонін, HSF-1 і глутамін реалізують нейропротективну дію за рахунок активації ланок ендогенної нейропротекції – підсилення експресії мРНК HSP70, мРНК Hif-1α, мРНК Hif-3α, підвищення рівня HSP70. Призначення досліджуваних препаратів гальмує розвиток оксидативного і нітрозативного стресу, а також усуває мітохондріальну дисфункцію за рахунок HSP70/GSH-залежних механізмів активації антиоксидантної системи. Встановлено, що усунення енергетичного дефіциту на фоні лікування досліджуваних препаратами спостерігається за рахунок позитивної модуляції HSP70/HIF-1α-залежних механізмів регуляції малат-аспартатного човникового механізму енергопродукції. На фоні призначення тамоксифену, мелатоніну, HSF-1 і глутаміну спостерігається зменшення проявів нейродеструктивних пошкоджень структур головного мозку, підвищується щільність нейронів сенсомоторної зони кори, гальмується нейроапоптоз, підвищується вміст РНК в нейронах сенсомоторної зони кори і, як наслідок, зменшуються прояви неврологічних і когнітивних порушень у експериментальних тварин. Досліджувані препарати достовірно підвищують виживання тварин з експериментальною церебральною ішемією. Molecular-biochemical mechanisms of the neuroprotective action of tamoxifen, melatonin, HSF-1 and glutamine, aimed at increasing the concentration of heat shock protein HSP70 in the ischemic brain, were investigated in the thesis. Increasing the HSP70 level results in an increase in the resistance of neurons to ischemic damage in in vitro and in vivo experiments. The investigated drugs: tamoxifen, melatonin, HSF-1 and glutamine have neuroprotective effect through activation of endogenous neuroprotection units - increased expression of HSP70 mRNA, Hif-1 α mRNA, Hif-3 α mRNA, and increased HSP70 level. It is found that the elimination of energy deficit on the background of treatment with the studied drugs is observed due to the positive modulation of HSP70/HIF-1α - dependent mechanisms of regulation of malate-aspartate shuttle mechanism of energy production. Tamoxifen, melatonin, HSF-1 and glutamine on in vitro model of glutamate excitotoxicity inhibited the rate of development of oxidative stress and the accumulation of markers of protein degradation of AFG (26,1-50,8%), KFG (19,1-49,5%) and nitrotyrosine (13,9-38,3%) against the background of the increase of the HSP70 concentration (46-97,6%) and the level of GSH (6,6-82,2%) and increased activity of glutathione-specific enzymes (GR 10,5-45,4%, GST 14,3-43,5%). In vitro experiments showed that there was a close direct relationship between the concentration of GSH and HSP70, as well as the inverse relationship between the level of nitrotyrosine and the concentration of HSP70. In vivo experiments in the acute cerebral ischemia model showed characteristic manifestations of ischemic damage: oxidative and nitrosative stresses growth, a decrease in the concentration of endogenous neuroprotector HSP70 decrease in GSH level, inhibition of GR, GST activity, increasing energy deficit. Tamoxifen, melatonin, HSF-1, and glutamine leads recovering of endogenous neuroprotection units - the HSP70 level increased in the cytosolic fraction 1,5-11,3 times (p<0.05), in the mitochondrial fraction 1,1-2,6 times (p<0,05), Hsp70 gene expression increased 1,7-4,1 times (p<0.05), Hif-1α mRNA expression 7,0-11,6 times (p<0.05), Hif-3α mRNA 3,6 times (p<0.05) (in the group with melatonin). Activation of endogenous mechanisms of neuroprotection restored the work of thiol-disulfide antioxidant system - GSH level increased 3,1-4,1 times (p<0.05), activity of GR and GST increased 2.3-3.4 times (p<0.05) and 1.3-1.6 times (p<0.05) respectively, relative to the control group of animals. Therapy with tamoxifen, melatonin, HSF-1 and glutamine for 4 days significantly inhibited the progress of oxidative and nitrizative stresses, as evidenced by a decrease in the level of AFG/KFG in the range from 22.5/28.7% to 32.5/35,3%, and nitrotyrosine concentration from 60% to 69.9% (p<0.05). At the same time, the drugs increased the activity of SOD from 41,8% to 84,7% (p<0.05).2020-01-01T00:00:00ZЦілеспрямований пошук нейропротективних сполук з антиоксидантним механізмом дії серед похідних ксантинів
http://dspace.zsmu.edu.ua/handle/123456789/17059
Название: Цілеспрямований пошук нейропротективних сполук з антиоксидантним механізмом дії серед похідних ксантинів
Авторы: Носач, Світлана Григорівна; Nosach, S. G.
Аннотация: Вперше отримані результати про антиоксидантну активність 52 сполук похідних ксантиніл-7-ацетатних і ксантиніл-8-тіоацетатних кислот та 3-R-гідроксиметилксантинів. Визначено, що гідразид 8-бензиламінотеофілініл-7-ацетатної кислоти (С-3) в дослідах in vitro (за інгібуванням NO, за інгібуванням окислювальної модифікації білка, та за інгібуванням Fe2+-залежного ВРО ) за силою антиоксидантної активності перевершує референс-препарати (тіотриазолін, дибунол і N-ацетилцистеїн).
Вперше на моделях ГПМК (двобічної перевʼязки загальних сонних артерій та внутрімозкового введення аутокрові) встановлена нейропротективна активність С-3, яка спрямована на гальмування оксидативного нітрозуючого стресу, нейроапоптозу, підвищення щільності нейронів IV-V шарів кори головного мозку, активність антиоксидантних ферментів, активацію компенсаторних шунтів продукції АТФ, як наслідок, зменшення летальності та неврологічних порушень у експериментальних тварин. Встановлено перевагу С-3 перед тіотриазоліном, цитіколіном і мексидолом. Нейропротективна дія С-3 в умовах ГПМК спрямована на гальмування нітрозуючого та оксидативного стресу, зниження загибелі нейронів кори головного мозку, підвищення продукції АТФ мітохондріально-цитозольними шунтами і, як наслідок, на зменшення летальності та неврологічних порушень у експериментальних тварин. В основі нейропротективної дії С-3 лежить його антиоксидантний механізм, а саме здатність зв'язувати NO і тим самим переривати АФК-залежні механізми нейроапоптозу, порушення енергопродукуючої функції мітохондрій і пошкодження СОД. The dissertation is devoted to the actual task of pharmacology - the search for new effective medicamentous remedies for violations of cerebral circulation on the basis of derivatives of 3-alkyl (aryl, aralkyl) xanthine. In vitro studies (inhibition of NO, protein oxide modification and Fe2+ dependent free radical oxidation (FRO), and also the evaluation of the efficacy of the compound under the conditions of simulation of acute cerebrovascular accident were performed in 52 samples of xanthine derivatives of 8-benzylamino-thiophenyl-7-acetic acid hydrazide (C-3) and experimentally substantiated application as a neuroprotector with an antioxidant mechanism of action. It was established that the compound C-3 belongs to the IV class of toxicity: LD50 in the intragastric administration of rats is 2100 ± 142.8 mg/kg. In order to determine further studies of the most promising compound of S-3-hydrazide 8-benzylaminoteo-filillin-7-acetate, and taking into account the parameters of its acute toxicity, an effective dose of the compound has been experimentally determined. The effective dose of C-3 was determined on the model of a one-sided ligature of the common carotid artery (acute disorder of blood flow) of rats. According to all experimental parameters (determination of nitrotyrosine, BB-CPK) the effective dose of C-3 is a dose of 100 mg/kg of animal weight.
It was found that intragastric administration of C-3 at a dose of 100 mg/kg on the 4th and 18th days in rats with bilateral ligation of common carotid arteries and intracerebral hemorrhage leads to a decrease in the mortality of animals in the acute period on the 4th day by 62% and 75%, and on the 18th day of a late acute period by 75% and 68% in the simulation of ICH, as well as the reduction of the neurological deficit (by 11-12.4 points on the scale of C.P. McGraw).2020-01-01T00:00:00ZНейропротективна активність модуляторів системи глутатіону в умовах моделювання церебральної ішемії
http://dspace.zsmu.edu.ua/handle/123456789/17058
Название: Нейропротективна активність модуляторів системи глутатіону в умовах моделювання церебральної ішемії
Авторы: Литвиненко, Олена Семенівна; Lytvynenko, E. S.
Аннотация: Дисертаційна робота присвячена експериментальному дослідженню нейропротективних властивостей селенази, глутоксима і глутаредоксіна в якості засобів глутатіон-залежних механізмів ендогенної цитопротекції в дослідах in vivo та in vitro. Встановлено, що нейропротективна активність селенази, глутоксиму і глутаредоксіну в умовах гострої експериментальної ішемії головного мозку спрямована на активацію глутатіон - залежних ланок ендогенної нейропротекції. З’ясовано, що досліджувані модулятори системи глутатіону ‒ селеназа, глутоксим і глутаредоксін підвищують експресію мРНК HSP70, HIF-1α і HIF-3α в умовах гострої експериментальної ішемії головного мозку. Експериментально продемонстровано позитивний вплив модуляторів системи глутатіону в дослідах in vivo та in vitro на вміст ендогенного нейропротектора ‒ белка теплового шоку HSP70. Доведено, що застосування селенази, глутоксима і глутаредоксіна в дослідах in vitro призводить до зниження вмісту NR-2 пептиду, що супроводжується пригніченням процесів глутаматної ексайтотоксичності. Розширені дані про вплив глутаредоксіна і глутоксима на енергетичний обмін і функціональну активність мітохондрій головного мозку в умовах ішемії. Встановлено, що селеназа, глутоксим і глутаредоксін гальмують реакції оксидативного та нітрозуючого стресу на тлі нормалізації глутатіонової системи в головному мозку, знижують летальність та неврологічний дефіцит експериментальних тварин. Визначено, що дія цих засобів має виразніший характер, ніж дія пірацетаму. The thesis is dedicated to the experimental investigation of molecular biochemical mechanisms of glutoxim, selenase and glutaredoxin influence on energotropic and ROS links of ischemic neurodegeneration, and justification of their use as neuroprotective agents. According to the results of the research, mechanisms of neuroprotective action of selenase, glutoxim and glutaredoxin have been established. Specifically, the researched examined the effects of modulators of the glutathione system during in vitro and in vivo studies on target endogenous neuroprotection mechanisms, and their effect on the synthesis of HSP70, the expression of the HSP70 mRNA, the HIF-1α mRNA, and HIF -3α mRNA. The research also examined and determined the mechanisms of selenase, glutoxim and glutaredoxin influence on the functional activity of mitochondria, and energy metabolism of the brain in the state of ischemia. It has been established that selenase, glutoxim and glutaredoxin inhibit the oxidative and nitrosative stress responses against the normalization of the glutathione system in the brain of test animals in the acute period of cerebral ischemia. For the very first time, this research provides the theoretical foundation and an experimental solution of the actual task of pharmacology – treatment optimization of acute cerebrovascular disorders, which consists of the use of selenase, glutoxim and glutaredoxin as the means of activation of GSH-dependent mechanisms of endogenous neuroprotection. The results of the research indicated that simulation of an acute cerebrovascular accident in test animals leads to a stable energy deficit (decrease of the ATP level by 60.8%), mitochondrial dysfunction (drop in the transmembrane potential of mitochondria by 78.2%, and an increase in the degree of mitochondrial porе opening by 80%), an increase in oxidative reactions (increase of AFН level by 125.2%, KFН by 201.8%) and nitrosative stress (increase of nitrotyrosinе level by 4.36 times), an increase in the level of pro-inflammatory cytokines as a result of the disruption in the antioxidative system functions, deprivation of glutathione (decrease of GSH level by 85.6%), and a decrease in activity of endogenous neuroprotection indicators - HSP70 chaperone proteins (by 16.3%).2018-01-01T00:00:00ZНейропротективна дія сполук L-лізину при хронічному алкоголізмі
http://dspace.zsmu.edu.ua/handle/123456789/15628
Название: Нейропротективна дія сполук L-лізину при хронічному алкоголізмі
Авторы: Павлюк, Іван Володимирович; Pavlyuk, I. V.; Павлюк, И. В.
Аннотация: В дисертаційній роботі вперше отримані дані про нейропротективну активність сполук L-лізину - L-лізину гідрохлориду, L-лізину есцинату, N6-(1-іміноетил) L-лізину дигідрохлориду, (S)-2,6-діаміногексанової кислоти 3-метил-1,2,4-триазоліл-5-тіоацетату на моделі ГАІ, дію даного виду активності, спрямовану на зменшення неврологічних порушень, відновлення поведінкових реакцій, а також на зниження оксидативного стресу і нейроапоптозу. Виявлено сполуку з найбільш вираженою нейропротективною активністю - (S)-2,6-діаміногексанової кислоти 3-метил-1,2,4-триазоліл-5-тіоацетат (Ангіолін). Вперше встановлено, що Ангіолін в умовах ХАІ призводить до підвищення щільності ендотеліоцитів судин головного мозку, підвищення експресії ендотеліального фактора росту (VEGF), гальмування оксидативного стресу, підвищення аеробної продукції АТФ, підвищення щільності нейронів СА1-зони гіпокампа, гальмування нейроапоптозу, підвищення експресії антиапоптичного білка bcl-2, підвищення РНК в нейронах СА1-гіпокампа і, як наслідок, зменшення неврологічних і когнітивних порушень у експериментальних тварин. The aim of the thesis was to study the neuroprotective properties of L-lysine compounds on the basis of experimentally proved mechanisms of the positive effect of the most active compound on structural and functional disorders of the brain under experimental chronic alcohol intoxication (CAI) to substantiate the objective possibilities of its use as an effective agent with this action.
The compound with the most pronounced neuroprotective activity - (S)-2,6-diaminohexanoic acid 3-methyl-1,2,4-triazolyl-5 thioacetate (Angiolin), which belongs to the V toxicity class (MLD50 in intragastrically administration to rats -15000±211 mg/kg) was found among the L-lysine hydrochloride of L-lysine aescinat, N6- (1- iminoethyl) L-lysine dihydrochloride, (S) -2,6 diaminohexanoic acid 3-methyl-1,2,4-triazolyl -5-thioacetate in acute alcohol intoxication, and its median effective doze (MED50) and median lethal dose (MLD50) were determined. Впервые получены данные о нейропротективной активности соединений L-лизина - L-лизина гидрохлорида, L-лизина эсцината, N6- (1-иминоэтил) L-лизина дигидрохлорида, (S) -2,6-диаминогексановой кислоты 3-метил -1,2,4-триазолил-5-тиоацетата на модели ОАИ. Действие данного вида активности направлено на уменьшение неврологических нарушений, восстановление поведенческих реакций, а также на снижение оксидативного стресса и нейроапоптоза. Выявлено соединение с наиболее выраженной
нейропротективной активностью - (S)-2,6-диаминогексановой кислоты 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат (Ангиолин). Установлено, что Ангиолин в условиях ХАИ приводит к повышению плотности эндотелиоцитов сосудов головного мозга, повышению экспрессии эндотелиального фактора роста (VEGF), торможению оксидативного стресса, повышению аэробной продукции АТФ, повышению плотности нейронов СА1-зоны гиппокампа, торможению нейроапоптоза, повышению экспрессии антиапоптического белка bcl-2, повышению РНК в нейронах СА1-гиппокампа и, как следствие, уменьшению неврологических и когнитивных нарушений у экспериментальных животных.2018-01-01T00:00:00Z