Оцінка результатів впровадження genotypemtbdrplus v.2 для ранньої діагностики мультирезистентний форм туберкульозу у Запорізькій області

Abstract

Метою дослідження було провести оцінку отриманих результатів дослідження клінічних зразків мокротиння за допомогою тест-системи Geno TypeMTBDRplus v.2 з метою ранньої діагностики мультирезистентного туберкульозу у Запорізькій області. Від 200 хворих з новими та повторними випадками захворювання на туберкульоз з наявністю бактеріовиділення отримано по 1 зразку мокротиння. Діагностика резистентності до Rif в тесті GenoType MTBDRplus, v.2 була вища на 18%, ніж в тесті Genexpert MTB/RIF. Визначається висока частота мутації в гені rpoB (46,5%) та одночасно в 2 генах katG + inhA (34%). Мутації одночасно в 3 генах rpoB + katG + inhA діагностовано у 26,5% випадках. Чутливість тест-системи GenoType MTBDRplus, v.2 склала 97,2%, а специфічність – 85%. В результаті проведених досліджень встановлено, що у хворих з новими та повторними випадками захворювання на туберкульоз з наявністю бактеріовиділення застосування тест-системи GenoType MTBDRplus, v.2 дає можливість на протязі 2-х діб встановити діагноз мультирезистентного туберкульозу у 37,5%. Резюме. Цель исследования – провести оценку полученных результатов исследования клинических образцов мокроты с помощью тест-системы GenoTypeMTBDRplus, v.2 с целью ранней диагностики мультирезистентного туберкулеза в Запорожской области. От 200 больных с новыми и повторными случаями заболевания туберкулезом с наличием бактерио-выделения получено по 1 образцу мокроты. Диагностика резистентности к Rif в тесте GenoType MTBDRplus, v.2 была выше на 18%, чем в тесте Genexpert MTB/RIF. Определяется высокая частота мутации в гене rpoB (46,5%) и одновременно в 2 ге- нах katG + inhA (34%). Мутации одновременно в 3 генах rpoB + katG + inhA диагностировано у 26,5% слу- чаях. Чувствительность тест-системы GenoTypeMTBDRplus, v.2 составила 97,2%, а специфичность – 85%. В результате проведенных исследований установлено, что у больных с новыми и повторными случаями заболевания туберкулезом с наличием бактериовыделения применение тест-системы GenoTypeMTBDRplus, v.2 дает возможность в течение 2-х суток установить диагноз мультирезистентного туберкулеза в 37,5 %. Abstract. The article is a fragment of the research work of the Department of Phthisiology and Pulmonology of the Zaporizhzhia State Medical University under the grant "Evaluation of the results of GenoTypeMTBDRplus v.2 implementation for the early diagnosis of multi-resistant forms of tuberculosis in Zaporizhzhia region, Ukraine" (2016-2017). Logistics: Merrier Foundation (France) on the basis of a memorandum between Zaporizhzhia State Medical University and Merrier Foundation (France), 2015. Multidrug resistant tuberculosis (MDRTB) is the most common infectious disease and the most unfavorable form of tuberculosis. The GenotypeMTBRplus v.2 provides rapid identification of the M. tuberculosis complex and the detection of gene mutations in rpoB (Rif) codon and mutations in the katG and inhA codons that are associated with isoniazid resistance. Study objective is to evaluate the obtained results of the study of clinical specimens of sputum using Geno- TypeMTBDRplus v.2 test system for the early diagnosis of MRTB in Zaporizhzhia region. Study object and methods. 200 patients with new and repeated cases of tuberculosis with the presence of bacterial excretion provided one sputum sample each which was used for microscopy, Genexpert MTB/RIF and GenoTypeMTBDRplus v.2 tests, cultures on the Levenstein-Jensen medium with MBT cultures. The decontamination of clinical specimens was carried out in the microbiological laboratory of the III level of Municipal Establishment "Zaporizhzhia Regional Tuberculosis Clinical Dispensary" using Eppendorf ThermoStat C (Germany). Study was carried out using the GenoTypeMTBDRplus test system v.2 (Hain Lifescience GmbH, Germany) in the department of molecular genetic research of the Department of Microbiology, Virology and Immunology of the Zaporizhzhia State Medical University in accordance with the stepwise manufacturer's instructions. Study results. The diagnosis of resistance to Rif in the GenoTypeMTBDRplus, v.2 test was higher by 18% than in the Genexpert MTB/RIF test (46,5% versus 28,5 %, p˂0,001). When using the GenoTypeMTBDRplus, v.2 test system in Zaporizhzhia region, a significantly higher mutation rate in the rpoB gene (46,5%) and simultaneous mutations in the 2 genes of katG + inhA (34%) are determined. In this case, simultaneous mutations in 3 genes of rpoB + katG + inhA are diagnosed in 26,5% of cases. Irrespective of the concentration of acid-resistant bacteria in the smear, the multidrug resistance (37,5%) is significantly more likely to be diagnosed compared with isolated resistance to isoniazid (28,7%) or rifampicin (2,2%) and sensitivity of the samples (31,6%). The sensitivity of the GenoTypeMTBDRplus test system, v.2 is 97,2%, and the specificity is 85%. Conclusions. Thus, performance of GenoTypeMTBDRplus, v.2 tests is more complicated than Genexpert MTB/RIF, and the tests are more sensitive. In patients with new and repeated cases of tuberculosis with the presence of bacteria, the use of GenoTypeMTBDRplus, v.2 test system provides 2 days to diagnose MDRTB in 37,5% of cases and to start the optimal treatment of antimycobacterial therapy in a timely manner for these patients.