Характеристика уровня экспрессии E-кадгерина и β-катенина в гепатоцеллюлярном и холангиоцеллюлярном раке печени

Abstract

С целью определения уровня иммуногистохимической экспрессии E-кадгерина и β-катенина в гепатоцеллюлярном и холангиоцеллюлярном раке печени разного диаметра, а также площади иммунопозитивных клеток в этих опухолях исследованы трепанобиоптаты печени 94 больных, среди которых 55 (58,51%) пациентов страдали гепатоцеллюлярным раком (ГЦР) и 39 (41,49%) – холангиоцеллюлярным раком (ХЦР) печени. C учетом размеров опухоли, определенных при ультразвуковом исследовании печени, были исследованы 21 ГЦК и 17 ХЦК диаметром до 5 см, а также 34 ГЦК и 22 ХЦК диаметром более 5 см. Экспрессию клетками Е-кадгерина определяли с помощью моноклональных антител Mо а-Hu E-Cadherin, Clone NCH-38, а экспрессию β-катенина – с применением моноклональных антител Mo a Hu Beta-Catenin, Clone E247 ß-Catenin-1. Уровень экспрессии иммуногистохимических маркеров опухолевыми клетками и площадь иммунопозитивных опухолевых клеток определяли фотоцифровой морфометрией в программе обработки цифровых изображений ImageJ. Установлено, что у 63,64% больных ГЦР и у 100% больных ХЦР печени в злокачественных клетках определяется мембранная либо мембранно-цитоплазматическая экспрессия E-кадгерина. Е-кадгерин иммунопозитивные клетки составляют 42,25±15,12% площади среза ткани ГЦР и 35,13±15,69% площади среза ткани ХЦР печени. В 94,55% случаев ГЦР рака и у 100% больных ХЦР печени в опухолевых клетках выявлена мембранная экспрессия β-катенина, сочетающаяся с цитоплазматической либо ядерной экспрессией этого белка. β-катенин иммунопозитивные клетки составляют 62,39±20,41% площади среза ткани ГЦР и 55,83±19,67% площади среза ткани ХЦР печени. В ГЦР и ХЦР между низким уровнем экспрессии опухолевыми клетками E-кадгерина и высоким уровнем экспрессии β-катенина отмечена прямая сильная корреляционная связь. В крупных ГЦР и ХЦР в сравнении с меньшими опухолями диаметром до 5 см статистически достоверно меньшую площадь занимают Е-кадгерин-иммунопозитивные клетки и большую – β-катенин-иммунопозитивные клетки. Сравнение экспрессии опухолевыми клетками адгезивно-миграционных маркеров показывает, что гепатоцеллюлярный и холангиоцеллюлярный рак характеризуется ранней утратой межклеточных адгезивных связей и высокими потенциями к инвазивному росту в печени. З метою визначення рівня імуногістохімічної експресії E-кадгерину та β-катеніну в гепатоцелюлярному та холангіоцелюлярному раку печінки різного діаметра, а також площі імунопозитивних клітин у цих пухлинах здійснили дослідження трепанобіоптатів печінки 94 хворих, серед них 55 (58,51%) пацієнтів страждали на гепатоцелюлярний рак (ГЦР) і 39 (41,49%) – на холангіоцелюлярний рак (ХЦР) печінки. З урахуванням розмірів пухлини, що визначені при ультразвуковому дослідженні печінки, дослідили 21 ГЦК і 17 ХЦК діаметром до 5 см, а також 34 ГЦК і 22 ХЦК діаметром більш ніж 5 см. Експресію клітинами Е-кадгеринів визначали за допомогою моноклональних антитіл Mо а-Hu E -Cadherin, Clone NCH-38, а експресію β-катеніна – із застосуванням моноклональних антитіл Mo a Hu Beta-Catenin, Clone E247 ß-Catenin-1. Рівень експресії імуногістохімічних маркерів пухлинними клітинами та площа імунопозитивних пухлинних клітин визначали за допомогою фотоцифрової морфометрії у програмі обробки цифрових зображень ImageJ. Установили, що у 63,64 % хворих на ГЦР та у 100% хворих на ХЦР печінки у злоякісних клітинах визначається мембранна або мембранно-цитоплазматична експресія E-кадгеринів. Е-кадгерин імунопозитивні клітини становлять 42,25±15,12% площі зрізу тканини ГЦР і 35,13±15,69% площі зрізу тканини ХЦР печінки. У 94,55% випадків ГЦ раку та у 100% хворих на ХЦР печінки в пухлинних клітинах виявлена мембранна експресія β-катеніну, що поєднується з цитоплазматичною або ядерною експресією цього білка. β-катенін імунопозитивні клітини становлять 62,39±20,41% площі зрізу тканини ГЦР і 55,83±19,67% площі зрізу тканини ХЦР печінки. У ГЦР і ХЦР між низьким рівнем експресії пухлинними клітинами E-кадгерину та високим рівнем експресії β-катеніну визначали прямий сильний кореляційний зв’язок. У великих ГЦР і ХЦР у порівнянні з меншими пухлинами діаметром до 5 см статистично вірогідно меншу площу займають Е-кадгерин-імунопозитивні клітини та велику – β-катенін-імунопозитивні клітини. Порівняння експресії пухлинними клітинами адгезивно-міграційних маркерів засвідчує: гепатоцелюлярний і холангіоцелюлярний рак характеризується ранньою втратою міжклітинних адгезивних зв’язків і високими потенціями до інвазивного росту в печінці. Aim. In order to determine the level of immunohistochemical expression of E-cadherin and β-catenin in hepatocellular and cholangiocellular liver cancer of different diameters and areas of the immunopositive cells trephine biopsies of liver of 94 patients were studied, among them 55 (58,51%) had hepatocellular carcinoma (HCC) and 39 (41,49%) had cholangiocellular liver cancer (CCC). Methods and results. Considering the size of the tumor determined by ultrasound examination of the liver 21 HCC and 17 CCC less than 5 cm in diameter, and 34 HCC and 22 CCC with diameter more than 5 cm were assayed. The expression of E-cadherin by cells was determined using a monoclonal antibody Mo-Hu E -Cadherin, Clone NCH-38, and the expression of β-catenin - using monoclonal antibodies Mo a Hu Beta-Catenin, Clone E247 ß-Catenin-1. The level of expression of immunohistochemical markers of tumor cells and immunopositive tumor cells area were determined by photo digital morphometry in digital image processing program Image J. It was found that in 63,64% of patients with HCC and 100% of patients with CCC, liver cancer cells show membrane or membrane-cytoplasmic expression of E-cadherin. E-cadherin immunopositive cells make up 42,25±15,12% of area of HCC tissue section and 35,13±15,69% of area of liver tissue section of CCC. In the 94,55% of HCC cases and 100% of patients with CCC membrane expression of β-catenin, combined with a nuclear or cytoplasmic expression of the protein, was revealed in tumor cells. β-catenin immunopositive cells make up 62,39±20,41% of area of HCC tissue section and 55,83±19,67% of area of liver tissue section in CCC. In HCC and CCC, between low expression of E-cadherin by tumor cells and high levels of β-catenin a direct strong correlation is observed. In large HCC and CCC compared with smaller tumors up to 5 cm in diameter, signifi cantly smaller space was occupied by E-cadherin-immunopositive cells and larger area was occupied by β-catenin-immunopositive cells. Conclusion. The comparison of the expression of adhesively-migration markers by tumor cells shows that hepatocellular carcinoma and cholangiocellular cancer are characterized by early loss of intercellular adhesion bonds and high potencies to invasive growth in the liver.