Валідація методики кількісного визначення зопіклону в таблетках методом високоефективної рідинної хроматографії

Abstract

Зопіклон, (6-(5-хлор-2-піридинил)-6,7-дигідро-7-оксо-5H-пірроло[3,4-b]піразин-5-іловий естер 4-метил-1-піперазінкарбонової кислоти) – це агоніст бензодіазепінових рецепторів, діє на центральні рецептори макромолекулярного ГАМК (гамма-аміномас- ляна кислота)–бензодіазепін–хлоріонофорного комплексу і не діє на периферичні бензодіазепінові рецептори. Підвищує чутливість ГАМК-рецепторів до медіатора, що призводить до гальмування міжнейронної передачі в різних відділах центральної нервової системи. Скорочує період засинання, зменшує кількість нічних пробуджень, покращує якість сну, не змінює фазову структуру сну. Зопіклон ефективний у разі ситуативного безсоння, пов’язаного з психоемоційною напругою, зміною звичного ритму життя (наприклад за госпіталізації), десинхронозом, в т. ч. під час зміни часових поясів, позмінного режиму роботи. Сон настає протягом 20–30 хв після прийому і триває 6–8 год [1]. Зопіклон посилює дію алкоголю та препаратів, що пригнічують центральну нервову систему (похідні морфіну, седативні препарати, антидепресанти, барбітурати тощо), що може призвести до підсилення депресій та підвищення ризику суїциду. Застосування разом з похідними морфіну підвищує ризик зупинки дихання [3]. Виражена дія на центральну нервову систему призвела до поширення випадків зловживання зопіклоном у немедичних цілях для потенціювання дії наркотичних засобів та психотропних речовин [2]. Зопиклон является небензодиазепиновым гипнотиком, используемым для лечения бессонницы. Он относится к циклопиролонам. Так же как и бензодиазепины, увеличивает передачу нейромедиатора – ГАМК в центральной нервной системе. Из-за своих побочных действий (потенцирования других снотворных, седативных, антигистаминных, алкоголя) зопиклон используют в немедицинских целях, и при передозировке он имеет токсикологическое значение. Исходя из того, что препараты зопиклона пользуются достаточно высоким спросом на фармацевтическом рынке Украины, целесообразность обеспечения надежного контроля качества этих препаратов не вызывает сомнений. Цель работы – разработка и валидация согласно требованиям Государственной фармакопеи Украины удобной, экономичной и чувствительной методики количественного определения зопиклона в лекарственных формах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Использованно аналитическое оборудование: хроматограф Thermo Spectra System 2000, электронные весы KERN ABT-120-5DM, мерная посуда класса А. Фармацевтические препараты: таблетки Зопиклон 7,5 мг (Украина) и таблетки Соннат-КМП 7,5 мг (Украина). Хроматографирование осуществляли при таких условиях: колонка – с обращенной фазой С18 Hypersil Gold, Thermo Scientific ТМ, 4 × 150 мм; размер частиц сорбента – 5 мкм; подвижная фаза – смесь фосфатный буфер:ацетонитрил в соотношении 80:20; скорость потока – 1 мл/мин; детектор – УФ спекторометрический при длинне волны 304 нм; объем пробы – 20 мкл. Предлагаемая методика была применена к двум лекарственным формам зопиклона – таблеткам по 7,5 мг, произведенным украинскими фармацевтическими компаниями. Основные валидационные характеристики предложенной методики удовлетворяют требованиям Государственной фармакопеи Украины. Таким образом, разработана простая методика количественного определения зопиклона в фармацевтических препаратах, применимая для рутинного анализа. Согласно полученным экспериментальным данным, методика может быть корректно воспроизведена и пригодна для использования в лабораториях Государственной инспекции по контролю качества лекарственных средств, а также ОТК химико-фармацевтических предприятий и криминалистических лабораториях. Zopiclone is a nonbenzodiazepine hypnotic agent used in the treatment of insomnia. It is a cyclopyrrolone, which increases the normal transmission of the neurotransmitter GABA in the central nervous system, as benzodiazepines do, but in a different way. Due to adverse events (potentiation of other hypnotics, sedatives, anti-allergy, alcohol) Zopiclone used for non-medical purposes, and in overdose has toxicological significance. Based on the fact, that Zopiclone drugs have fairly high demand in the pharmaceutical market, there is no doubt in the supplying desirability of worthy quality control of these drugs. Purpose of this paper is study and validation of requirements for Ukrainian pharmacopoeia to find convenient, economical, highly sensitive methods of quantitative determination of Zopiclone in dosage forms by high performance liquid chromatography. Analytical equipment: chromatograph Thermo Spectra System 2000, electronic scales KERN ABT-120-5DM, measuring vessel class A. Pharmaceutical preparations: tablets Zopiclone 7.5 mg (Ukraine) and tablets Sonnat-KMP 7.5 mg (Ukraine). Spend chromatography following conditions: column – reversed phase Hypersil Gold C18, Thermo Scientific TM, 4 × 150 mm; particle size sorbent – 5 mm; mobile phase – a mixture of phosphate buffer:acetonitrile in the ratio of 80:20; the flow rate – 1 ml/min; detector – UV spectrophotometric wavelength 304 nm; semiinjector volume of samples is 20 ml. The proposed method is applied to the two dosage forms of Zopiclone – tablets to 7.5 mg, produced by various Ukrainian pharmaceutical companies. The main characteristics was validated by Pharmacopoeia of Ukraine. Thus, the developed method is simple and useful for routine analysis of zopiclone in pharmaceutical formulations and in-process quality control. According to the experimental data, the technique can be correctly reproduced and it is suitable for using in pharmaceutical and forensic analytical laboratories.