Validation of the method of quantitative determination of the active substance ((S)-2,6-diaminohexanoic acid 3-methyl-1,2,4-triazolyl-5-thioacetate in eye drops

Abstract

The purpose of the present work is to validate the method of quantitative determination of the active substance ((S)-2,6-diaminohexanoic acid 3-methyl-1,2,4-triazolyl-5-thioacetate) in Angiolin 1% eye drops by the method of high-performance liquid chromatography. Materials and methods. Certified substances were used: Angiolin, working standard sample, sodium chloride, purified water as auxiliary substances, liquid chromatograph with UV detector; column Hypersil ODS C-18250 X 4.6 with a particle size of 5 μm. Results. During the determination of validation parameters, it is established that the method is characterized by sufficient correctness, since the criterion of insignificance of the systematic error of the method is fulfilled. The systematic error of the method satisfies the requirements of statistical and practical insignificance. The high value of the correlation coefficient r=0.9999 satisfies the requirements of the acceptance criterion (r=0.99810) and confirms the linearity of the dependence between the amount of Angiolin taken and found in the range from 80% to 120%, following its nominal content in the preparation. The requirements for parameters of linear dependence (a, SD0/b, r) of the Angiolin determination method are met in the entire concentration range from 80% to 120% of the nominal value. Conclusions. The method of determining Angiolin by HPLC in the range of application of the method meets the acceptance criteria for validation characteristics: specificity, correctness, precision (convergence) and linearity. The total predicted uncertainty of the analyses results does not exceed the critical value regulated by the SPhU, and can be entered into the project of Quality Control Methods. Процедура валідації передбачена для того, щоб аналітична методика посіла гідне місце у системі забезпечення якості, відповідала своєму призначенню та гарантувала достовірні результати аналізу. У ході досліджень встановлено, що методика визначення Ангіоліну методом високоефективної рідинної хроматографії в діапазоні застосування методики відповідає критеріям прийнятності для валідаційних характеристик: специфічність, правильність, прецизійність та лінійність. Методика характеризується достатньою правильністю, оскільки виконується критерій незначущості систематичної похибки методики. Систематична похибка методики задовольняє вимоги статистичної та практичної незначущості. Повна прогнозована невизначеність результатів аналізів не перевищує критичне значення, регламентоване ДФУ.