Обговорення протимікробної та протигрибкової активності похідних 4-аміно-5-метил-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіолу

Abstract

Вивчення нових біологічно активних речовин з кожним днем набуває все більшої актуальності. Наявний асортимент на фармацевтичному ринку вимагає постійного оновлення вітчизняних препаратів. Основними вимогами для нових лікарських препаратів є висока ефективність, мала токсичність. Сучасна фармацевтична наука відокремлює похідні 1,2,4-тріазолу як перспективний клас для створення нових біологічно активних сполук. Мета роботи – пошук нових сполук похідних 4-аміно-5-метил-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіолу, дослідження їхніх протимікробних і протигрибкових властивостей. Об’єктами дослідження є похідні 4-аміно-5-метил-4Н-1,2,4-тріазол-3-тіолу, що представляють собою кристалічні речовини. Матеріали та методи. Чутливість мікроорганізмів до нових синтезованих сполук визначали методом серійних розведень відповідно до методичних вказівок на кафедрі мікробіології, вірусології та імунології Запорізького державного медичного університету. Під час досліджень із вихідної концентрації препарату 1 мг/мл готували ряд двократних серійних розведень препарату в бульйоні Мюллера–Хінтона в об’ємі 1 мл, після чого додавали у кожну пробірку по 0,1 мл мікробної суспензії (106 мікробних клітин/мл). Для первинного скринінгового дослідження синтезованих речовин застосовували еталонні тест-культури грампозитивних, грамнегативних бактерій та грибів, що належать до різних за морфофізіологічними властивостями клінічно значущих груп збудників інфекційних захворювань. Як набір стандартних тест-штамів взято Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomоnas aeruginosa ATCC 27853, Candida albicans ATCC 885–653. Усі тест-штами отримані з бактеріологічної лабораторії ДУ «Запорізький обласний лабораторний центр МОЗ України». Як контроль протимікробної активності сполук щодо досліджуваних штамів мікроорганізмів застосовували 0,05 % розчин хлоргексидину «Фаргомед» (Україна). Додатково здійснювали контроль поживних середовищ і розчинника за допомогою загальноприйнятих методик. Результати. Наведені підрахунки щодо протигрибкової та протимікробної активності. Результати показали, що сполукою-лідером виступив 4-((4-бромбензиліден)аміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-тіол, який проявляв протигрибкову активність проти Candida albicans: МІК – 7,8–62,5 мкг/мл, МБцК – 15,6–250 мкг/мл. Водночас відновлення цієї сполуки, а саме перехід до 4-((4-бромбензил)aміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-тіолу не призводить до появи протигрибкової дії, але зберігає протимікробну активність відносно Staphylococcus aureus. Висновки. Під час дослідження встановили деяку залежність «структура–дія», а також виявили сполуки, в яких протигрибкова активність перевищувала показники еталонного препарату хлоргексидину. Studying new biologically active substances nowadays become increasingly important. The current range of the pharmaceutical market requires constant updating of domestic products. The main requirements for new medications are high efficiency and low toxicity. Aim. Modern pharmaceutical science separates 1,2,4-triazole derivatives as a significant class to create new biologically active compounds. Our purpose is to find novel derivatives of 4-amino-5-methyl-4H-1,2,4-triazole-3-thiol, to study their antimicrobial and antifungal activity. Objects of research are derivatives of 4-amino-5-methyl-4H-1,2,4-triazole-3-thiol. Methods and results. The sensitivity of the microorganisms to the new synthesized compounds was determined by serial dilutions method in accordance with the “methodological guidelines” at the Department of Microbiology, Virology and Immunology (Zaporіzhzhia State Medical University). During initial studies with drug concentrations of 1 mg / ml, a series of two-fold serial dilutions of drug in the Mueller-Hinton solution in a volume of 1 ml were prepared, and then a microbial suspension was added to each tube in amount of 0.1 ml (106 microbial cells/ml). Reference test culture of Gram-positive and Gram-negative bacteria was used for primary screening studies of synthesized substances. As a set of standard test strains we took Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida albicans ATCC 885–653. All test strains have been obtained from the bacteriological laboratory of the State institution “Zaporizhzhіa Regional Laboratory Center of the State Sanitary and Epidemiological Service of Ukraine”. As a control of the antimicrobial activity of compounds we used 0.05 % chlorhexidine “Fargomed”. Total results of antifungal and antimicrobial activity. The results showed that the leader compound is 4-((4-brombenzyliden)amino)-5- methyl-4H-1,2,4-triazole-3-thiol, which showed antifungal and antimicrobial activity against Candida albicans MIC – 7,8–62.5 ug/ml, MBtsK – 15.6–250 ug/ml. Recovery of this compound, namely transition to 4-((4-bromobenzyl)amino)-5-methyl-4H-1,2,4-triazole-3- thiol, has no antifungal activity, but demonstrates antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. Conclusions. Researches have established some “structure–effect” relationship, and also found the compound, the antifungal activity of which is higher than in the reference chlorhexidine preparation.