Identification of phytosterins in Urtica dioica L. (overground part)

Abstract

Long since Urtica dioica L. was used in folk medicine as vitamin and hemostatic agents. Nowadays hypotensive, diuretic, antitumoral effects of medicines obtained from plant based raw materials from Urtica were experimentally proved. Pharmacologic activity is due to vitamins K1 and C, flavonoids, hydroxycinnamic acids, carbonic acids, polysaccharides containing in the leaves of plant. Using underground organs of plant as antineoplastic drugs is connected with phytosterins accumulation. Studying composition and assessment of phytosterins in overground part of plant is urgent now. The aim of research is to identify components and to assess phytosterins content in leaves and herb of Urtica dioica L. in Ukrainian flora. Materials and Methods. For chromato-mass spectrometry leaves and herb gathered in blossoming period have been used. The samples have been extracted with methylene chloride in presence of tridecane inner standard, and then the samples have been concentrated and submitted to chromatography on chromatograph Agilent Technology 6890N. The components have been identified using register for mass spectra NIST02 and WILEY 2007 in combination with identification programs AMDIS and NIST. Results and Discussion. In both types of raw materials from Urtica dioica L. it has been revealed identical compounds related to olefins, higher aliphatic carbohydrates, phytosterins and so on. The total amount of biologically active substances extracted from the leaves is 529.76 mg/kg, from herbs it is 516.91 mg/kg. Untriacontane, nonocosane and trans-neophytadiene were predominant. Phytosterins stigmas-3,5,7-triene, campesterol, β-sitosterol presented in leaves 16.14 mg/kg, in herb they presented 15.42 mg/kg, that forms 3 % approximately Conclusions. Composition and amount of phytosterins containing in leaves and herb of Urtica dioica L. study has been performed by chromate-mass-spectrometry. As a result three compounds of steroid nature have been identified: stigmas-3,5,7-trien, campesterol, β-sitosterol. Amount of phytosterins is approximately 3 %. Кропива дводомна здавна застосовується в народній медицині як вітамінний і кровоспинний засіб. На сьогодні експериментально доведена гіпотензивна, сечогінна, протиракова активність препаратів, що вироблені з лікарської рослинної сировини кропиви. Фармакологічна активність листя кропиви зумовлена вмістом вітамінів К1, С, флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, карбонових кислот, полісахаридів. Використання підземних органів рослини при виготовленні препаратів антинеопластичної дії пов’язане передусім із накопиченням фітостеринів. Актуальним є вивчення складу та кількісного вмісту фітостеринів у надземній частині рослини. Мета роботи – визначення складу та кількісного вмісту фітостеринів у листі та траві кропиви дводомної флори України. Матеріали та методи. Для здійснення хромато-мас-спектрометричного дослідження використовували повітряно-суху надземну частину кропиви дводомної: листя і траву рослини, що заготовлена в період цвітіння. Під час аналізу зразки екстрагували хлористим метиленом у присутності внутрішнього стандарту тридекану, концентрували та хроматографували за допомогою хроматографа Agilent Technology 6890N. Компоненти ідентифікували з використанням бібліотеки мас-спектрів NIST02 і WILEY 2007 у поєднанні з програмами ідентифікації AMDIS і NIST. Результати. Під час досліджень в обох видах сировини кропиви дводомної виявили ідентичні з’єднання, що належать до олефінів, вищих аліфатичних вуглеводнів, фітостеринів тощо. Загальний вміст виділених біологічно активних речовин для листя становив 529,76 мг/кг, для трави – 516,91 мг/кг. Серед них переважали унтріаконтан, нонакозан і транс-неофітадієн. На частку фітостеринів стігмаста-3,5,7-тріена, кампестеролу, β-сітостеролу припадає 16,14 мг/кг для листя та 15,42 мг/кг для трави рослини, що становить майже 3 %. Висновки. Методом хромато-мас-спектрометрії вивчили склад та кількісний вміст фітостеринів у листі та траві кропиви дводомної (Urtica dioica L.). У результаті експерименту ідентифіковано три з’єднання стероїдної природи: стігмаста-3,5,7-тріен, кампестерол, β-ситостерол. Кількісний вміст фітостеринів становить майже 3 %.